內容大綱 

什么是?HPLC ?
為什么?HPLC 移動相需要過濾呢?
為什么過濾能提升?HPLC 分析穩(wěn)定性?
怎么進行?HPLC 移動相過濾？
ROCKER 完整溶劑純化解決方案
如何選擇濾膜?

什么是 HPLC ?

高效液相層析法 (high performance liquid chromatography, HPLC) 是一種高效的分離及分析技術，
能夠對混合物進行分離，并定量分析各成分比例。HPLC 已被廣泛用于各個科學領域，
如藥物、食品、化妝品、保健品、毒品、法醫(yī)鑒定、環(huán)境基質等。

為什么 HPLC 移動相需要過濾呢?

在 HPLC 中，移動相 (mobile phase) 的質量會直接影響結果的準確性、再現(xiàn)性 (reproducibility)
及儀器的使用壽命。常見的移動相如乙腈 (acetonitrile, ACN)、甲醇 (methanol, MeOH)
或甲酸 (formic acid) 等，可能存在氣泡 (bubble)、顆粒 (particle)、污染物 (impurity)
或微生物 (microorganism) 等雜質。這些雜質會對 HPLC 系統(tǒng)造成許多負面影響，
如管柱阻塞 (column clogging)、產生大量噪聲 (noise) 及背景值 (background)、影響使用壽命等。

不過濾移動相會有什么影響？

§ ◆管柱堵塞：顆粒堆積會影響流速穩(wěn)定性，導致滯留時間漂移，并可能縮短管柱使用壽命。

§◆ 幫浦損壞：微?？赡苣p幫浦活塞 (piston) 與密封件 (seals)，導致基線 (baseline) 漂移和流速波動。

§◆ 系統(tǒng)堵塞：可能導致系統(tǒng)背壓升高 (high back pressure)，造成停機。

◆§ 干擾分析結果：與管柱材料作用，造成圖譜 (chromatogram) 噪聲及背景值上升，甚至產生偽峰。

§◆ 微生物污染：若移動相為水性緩沖液，可能導致微生物在其中繁殖、產生污染物，進而影響結果及堵塞系統(tǒng)。

◆此外，許多 HPLC 方法需要混合溶劑使用并/或添加鹽類 (salts)，
例如磷酸鹽 (phosphates) 或醋酸鹽 (acetates) 等。
這些額外的混合步驟或添加物可能因未完全溶解而產生微粒，
因此在使用前仍建議進行過濾，以確保溶液的純凈程度。
因此，為了保護 HPLC 系統(tǒng)、延長層析管柱 (HPLC column) 的使用壽命，
并獲得一致、準確、可重現(xiàn)的分析結果，
HPLC 移動相的過濾是必不可少的關鍵步驟。

為什么過濾能提升 HPLC 分析穩(wěn)定性?

真空過濾 (vacuum filtration) 是一種常用的移動相過濾方法，

§ ◆其可以有效去除顆粒及污染物，可避免系統(tǒng)阻塞，減少污染與磨損，
§ ◆延長耗材使用壽命。也因污染物被移除而降低噪聲，使分析結果更清晰、更具可信度。
§ ◆此外，真空過濾還同時具有脫氣 (degas) 的作用，可去除溶劑中溶解的氧氣 (oxygen)，
§ ◆減少樣品及溶劑的氧化降解 (oxidative degradation)，
§ ◆從而提升系統(tǒng)穩(wěn)定性 (stability) 及偵測器 (detector) 的靈敏度 (sensitivity)。
§ ◆簡而言之，過濾移動相是維護 HPLC 性能并實現(xiàn)高質量分析最簡單且經濟的方法。

怎么進行HPLC移動相過濾？

傳統(tǒng) HPLC 溶劑過濾時，通常使用玻璃過濾漏斗及錐形瓶，但存在以下風險：

◆過濾后需將溶劑轉移 (transfer) 至儲存瓶或血清瓶中，可能導致泄漏及交叉污染風險。

◆ 需手動將溶劑抬高并倒入漏斗，溶劑容易因傾倒角度或手部不穩(wěn)而溢出。

◆對于具揮發(fā)性 (volatility) 或毒性 (toxicity) 的溶劑，

◆其蒸氣 (vapor) 可能直接接觸操作者的眼、口、鼻等敏感部位，長期暴露下恐對健康構成威脅。

ROCKER 完整溶劑純化解決方案

全新推出的連續(xù)過濾裝置 – 滿足您過濾大量溶劑的需求 

Rocker 300C – VFC 47 

§ ◆連續(xù)進樣、直接儲存于血清瓶中，無需手動倒入樣品，避免交叉污染

§ ◆標配沉頭，可大量抽吸液體，減少殘留

§ ◆標配 GL45 過濾轉接座，過濾后可直接將濾液直接保存于 GL45 血清瓶中，不需分裝，避免二次污染

VFC 連續(xù)溶劑純化過濾系統(tǒng)裝置圖如下，詳情可參考安裝影片，或參考以下文字說明

1. 組裝設備：
GL45 玻璃瓶上，依序裝上 GL45 轉接過濾座及 VFC 47 連續(xù)玻璃過濾漏斗，
并分別將硅膠管依圖面連接。
* 若使用三角抽氣瓶或錐型瓶 (flask)，請直接將 8 號硅膠塞塞入瓶口或更換硅膠塞尺寸。

2. 放置濾膜或濾紙：
在 VFC 47 濾膜墊片上方放置濾膜后，再放回上蓋并以鋁夾夾緊。

3. 過濾：
將已連接硅膠管的沉頭放入未過濾的液體，啟動真空幫浦，開始過濾。

4. 儲液：
過濾完畢后，移除硅膠管、漏斗、轉接座，并關閉真空幫浦，
蓋上原本 GL45 瓶蓋，即可直接保存溶液。

如何選擇濾膜?

選擇合適的濾膜是確保過濾效果的關鍵，可根據不同的HPLC系統(tǒng)及目的進行選擇：

濾膜材質部份，則須依溶劑 (液) 特性挑選，常見的材質包含：PTFE、PVDF、Nylon 等。
以下列舉臺灣衛(wèi)生福利部食品藥物管理署公告/建議方法中移動相過濾所使用的濾膜類型：

應用：

HPLC 移動相過濾

溶劑純化與脫氣

微生物及污染物去除

參考文獻

· Mobile phase filtration

· 過濾對優(yōu)化?(U)HPLC 和 LC-MS 性能的重要性

·  Top Tips for LC-MS Sample Preparation